萨法维（Safavid）王朝积极招募东安纳托利亚（Eastern Anatolia）土库曼部落的支持。

这些部落的成员是奥斯曼帝国（Ottoman Empire）的臣民，萨法维王朝的招募活动不可避免地将邻近的奥斯曼帝国和萨法维推向了对抗的道路。

正如《伊朗百科全书》（Encyclopaedia Iranica）所述：

“作为正统派或逊尼派穆斯林，奥斯曼帝国有理由对其控制下地区的什叶派思想的传播感到警惕，但更为严重的政治危险在于，如果允许萨法维教团进一步扩展影响力，可能会导致安纳托利亚大片地区从奥斯曼帝国转向波斯的效忠。”

到1510年代初，伊斯梅尔一世迅速扩张的政策使萨法维在小亚细亚的边界进一步向西移动。

1511年，塔卡鲁（Takkalu）乞兹尔巴什部落在安纳托利亚南部发动了一场大规模的亲萨法维叛乱，称为沙库鲁叛乱（?ahkulu Rebellion，在前面的王位争夺章节曾提到），奥斯曼派出的军队被打败。

萨法维圣战士努尔·阿里·哈利法（Nūr-?Alī ?alīfa）率领的一支大规模部队入侵安纳托利亚东部，恰逢1512年苏丹塞利姆一世（Selim I）继位，这成为了塞利姆决定两年后入侵萨法维伊朗的导火索。

在进攻之前，塞利姆和伊斯梅尔之间曾互相写信，言辞十分强硬。

当萨法维军队在查尔德兰计划如何应对奥斯曼军队时，担任迪亚巴克尔总督的穆罕默德·汗·乌斯塔杰鲁（Mohammad Khan Ustajlu）和熟悉奥斯曼作战方式的指挥官努尔·阿里·哈利法建议应尽快发起进攻。

这一建议被有权势的乞兹尔巴什官员杜尔米什·汗·沙姆鲁（Durmish Khan Shamlu）粗暴地拒绝，后者讽刺道穆罕默德·汗·乌斯塔杰鲁只关心他所治理的省份。

伊斯梅尔自己也拒绝了这个提议，他说：“我不是劫匪，一切都将按神的旨意发生。”

塞利姆一世最终在1514年的查尔迪兰战役（Battle of Chaldiran）中击败了伊斯梅尔一世。

伊斯梅尔的军队更加机动，士兵准备更为充分，但奥斯曼军队凭借其高效的现代军队和拥有的火炮、黑火药和火枪取得了胜利。

伊斯梅尔在战斗中受伤，差点被俘。

塞利姆于9月5日进入伊朗首都大不里士，凯旋而归，但并未久留。

因担心被萨法维的援军包围，奥斯曼军队发生哗变，迫使塞利姆撤退，使得伊斯梅尔得以恢复元气。

大不里士的战利品中包括了伊斯梅尔最宠爱的妻子，塞利姆要求用巨大的让步换取她的释放，但被拒绝。

尽管在查尔迪兰战役中失败，伊斯梅尔很快恢复了大部分王国的领土，从凡湖（Lake Van）以东到波斯湾（Persian Gulf）。

不过，奥斯曼人成功地首次吞并了安纳托利亚东部和美索不达米亚的一部分，甚至短暂控制了伊朗西北部。